Influence de différents polymères aminés sur le développement de neurones corticaux primaires

Ce mémoire s’intéresse à l’optimisation de surfaces pour la culture cellulaire afin de favoriser spécifiquement le développement et la maturation de neurones corticaux primaires in vitro. La problématique principale est de comparer l’influence de revêtements de polymère aminé sur l’adhésion cellulaire, la croissance des neurites et la formation de réseaux synaptiques fonctionnels. Pour cela, quatre polymères ont été étudiés : le polyvinylamine (PVAm), le polyéthylèneimine branché 25 kDa et 800 Da (respectivement nommés PEIb1 et PEIb2) et le polyallylamine (PAAm). Ces polymères ont été attachés de manière covalente sur des lamelles de verre, puis comparés à la poly-D-lysine (PDL 5) prise pour référence. Les méthodes utilisées combinent une évaluation colorimétrique de la densité surfacique de groupes amines sur les lamelles fonctionnalisées, grâce au test au bleu de Coomassie brillant, et une analyse du développement neuronal par immunocytochimie, en utilisant la synaptophysine et la sous-unité GluR1 du récepteur au glutamate de type AMPA (α-amino-3-hydroxy-5-méthylisoxazol-4-propionate) comme marqueurs. Par ailleurs, la croissance des neurites et l’évolution de la surface cellulaire ont été suivies par microscopie en temps réel.