Transfection de CRISPR-Cas9 par optoporation médiée par nanoparticules d'or et laser femtoseconde

La découverte de la protéine CRISPR-Cas9 est une étape majeure de la recherche en biologie. Cette protéine a facilité significativement la manipulation de l’ADN d’une cellule et son application s’étend à de multiples secteurs. Cependant, pour fonctionner, la protéine CRISPR-Cas9 doit être introduite à l’intérieur d’une cellule et c’est aujourd’hui une des principales barrières à son utilisation. Les principales techniques de transfection se basent sur l’électroporation, l’utilisation de lipide ou de vecteurs viraux. Chacune des techniques a une efficacité propre et des contraintes intrinsèques, si bien qu’il n’existe pas de technique universelle transposable à la variété d’applications de CRISPR-Cas9. L’optoporation est une alternative de transfection qui fonctionne avec un laser, éventuellement couplé à des nanoparticules en contact avec la membrane de la cellule à transfecter. Le Laboratoire de Plasmonique et de Procédés Lasers (LP2L) a étudié l’utilisation de l’interaction entre un laser et des nanoparticules d’or et a montré l’efficacité de cette technique pour la transfection de différents matériels biologiques. L’irradiation de nanoparticules d’or par un laser provoque un phénomène physique de nanocavitation autour de la nanoparticule. Ce phénomène permet la formation de pores temporaires au niveau de la membrane plasmique. Pendant le temps d’ouverture du pore, le matériel biologique d’intérêt peut diffuser à l’intérieur de la cellule.